Galvenā atšķirība - plūsmas citometrija pret FACS
Šūnu teorijas kontekstā šūnas ir visu dzīvo organismu galvenā strukturālā un funkcionālā vienība. Šūnu šķirošana ir metodoloģija, kas tiek izmantota dažādu šūnu atdalīšanai atbilstoši fizioloģiskajām un morfoloģiskajām pazīmēm. Viņiem var būt intracelulāri vai ārpusšūnu raksturlielumi. DNS, RNS un olbaltumvielu mijiedarbība tiek uzskatīta par intracelulārām interaktīvām īpašībām, savukārt forma, izmērs un dažādas virsmas olbaltumvielas tiek uzskatītas par ārpusšūnu īpašībām. Mūsdienu zinātnē šūnu šķirošanas metodoloģijas ir veicinājušas dažādus pētījumus bioloģiskajos pētījumos, kā arī jaunu principu izveidi, izmantojot pētījumus medicīnā. Šūnu šķirošana tiek veikta pēc dažādām metodoloģijām, kas ietver gan primitīvu ar mazāku aprīkojumu, gan modernas tehnoloģiskās metodikas, izmantojot sarežģītas iekārtas. Plūsmas citometrija, fluorescējoši aktivēta šūnu šķirošana (FACS), magnētisko šūnu atlase un atsevišķu šūnu šķirošana ir galvenās izmantotās metodikas. Plūsmas citometrija un FACS tiek izstrādāti, lai diferencētu šūnas atbilstoši to optiskajām īpašībām. FACS ir specializēts plūsmas citometrijas veids. Plūsmas citometrija ir metodoloģija, kas tiek izmantota, analizējot neviendabīgu šūnu populāciju atbilstoši dažādām šūnu virsmas molekulām, lielumam un tilpumam, kas ļauj izpētīt atsevišķas šūnas. FACS ir process, kurā šūnu paraugu maisījums tiek sakārtots atbilstoši to gaismas izkliedes un fluorescences īpašībām divos vai vairāk konteineros. Šī ir galvenā atšķirība starp plūsmas citometriju un FACS.
SATURS
1. Pārskats un galvenās atšķirības
2. Kas ir plūsmas citometrija
3. Kas ir FACS
4. Līdzības starp plūsmas citometriju un FACS
5. Blakus salīdzinājums - Plūsmas citometrija pret FACS tabulas veidā
6. Kopsavilkums
Kas ir plūsmas citometrija?
Plūsmas citometrija ir metode, ko izmanto, lai pārbaudītu un noteiktu intracelulāro molekulu un šūnu virsmas ekspresiju, kā arī noteiktu un raksturotu atšķirīgus šūnu tipus. To lieto arī, lai noteiktu šūnu tilpumu un šūnu lielumu, kā arī lai novērtētu izolēto apakšpopulāciju tīrību. Tas ļauj vairāku parametru vērtējumu veikt vienās šūnās aptuveni vienlaikus. Plūsmas citometriju izmanto, lai noteiktu fluorescences intensitāti, kas rodas fluorescējoši iezīmētu antivielu dēļ, kas palīdz identificēt olbaltumvielas vai ligandus, kas saistās ar saistītajām šūnām.
01. attēls: Plūsmas citometrija
Parasti plūsmas citometrija galvenokārt ietver trīs apakšsistēmas. Tie ir šķidrumi, elektronika un optika. Plūsmas citometrijā ir pieejami pieci galvenie komponenti, kurus izmanto šūnu šķirošanā. Tās ir plūsmas šūna (šķidruma plūsma, ko izmanto, lai tās transportētu un šūnas izlīdzinātu optiskās uztveršanas procesam), mērījumu sistēma (var būt dažādu sistēmu, ieskaitot dzīvsudraba un ksenona lampas, ar lielu jaudu ar ūdeni vai ar ūdeni. mazjaudas gaisa dzesēšanas lāzeri vai diode lāzeri), ADC; Analogu uz ciparu pārveidotāju sistēma, pastiprināšanas sistēma un dators analīzei. Iegūšana ir process, kurā datus no paraugiem vāc, izmantojot plūsmas citometru. Šo procesu nodrošina dators, kas savienots ar plūsmas citometru. Datorā esošā programmatūra analizē informāciju, kas tiek ievadīta datorā no plūsmas citometra. Programmatūrai ir arī iespēja pielāgot eksperimenta parametrus, kontrolējot plūsmas citometru.
Kas ir FACS?
Plūsmas citometrijas kontekstā ar fluorescenci aktivēta šūnu šķirošana (FACS) ir metode, ko izmanto, lai diferencētu un šķirotu bioloģisko šūnu maisījuma paraugu. Šūnas tiek atdalītas no diviem vai vairākiem traukiem. Šķirošanas metode ir balstīta uz šūnas fizikālajām īpašībām, kas ietver gaismas izkliedi un šūnas fluorescences īpašības. Šī ir svarīga zinātniskā metode, kuru var izmantot, lai iegūtu ticamus kvantitatīvus un kvalitatīvus fluorescences signālu rezultātus, kas tiek izstaroti no katras šūnas. FACS laikā sākotnēji iepriekš iegūtais šūnu maisījums; suspensija tiek novirzīta uz šauras, strauji plūstošas šķidruma plūsmas centru. Šķidruma plūsma ir paredzēta, lai šūnas suspensijā atdalītu, pamatojoties uz katras šūnas diametru. Suspensijas plūsmai tiek piemērots vibrācijas mehānisms, kā rezultātā veidojas atsevišķi pilieni.
02. attēls: FACS
Sistēma ir kalibrēta, lai izveidotu vienu pilienu ar vienu šūnu. Tieši pirms pilienu veidošanās plūsmas suspensija pārvietojas pa fluorescences mēraparātu, kas nosaka katrai šūnai raksturīgo fluorescenci. Pilienu veidošanās vietā tiek novietots elektriskais lādēšanas gredzens, kuru pirms fluorescences intensitātes mērīšanas gredzenam inducē lādiņš. Kad no suspensijas plūsmas ir izveidojušies pilieni, pilienu starpā tiek ieslodzīts lādiņš, kas pēc tam nonāk elektrostatiskās novirzes sistēmā. Saskaņā ar lādiņu sistēma pilienus novirza dažādos traukos. Maksas piemērošanas metode atšķiras atkarībā no dažādām FACS izmantotajām sistēmām. Iekārtas, kuras izmanto FACS, ir pazīstamas kā fluorescenci aktivizētu šūnu šķirotājus.
Kāda ir plūsmas citometrijas un FACS līdzība?
Plūsmas citometrija un FACS tiek izstrādāti, lai diferencētu šūnas atbilstoši to optiskajām īpašībām
Kāda ir atšķirība starp plūsmas citometriju un FACS?
Atšķirīgs raksts vidū pirms tabulas
Plūsmas citometrija pret FACS |
|
| Plūsmas citometrija ir metodoloģija, kas tiek izmantota, analizējot neviendabīgu šūnu populāciju atbilstoši dažādām šūnu virsmas molekulām, lielumam un tilpumam, kas ļauj izpētīt atsevišķas šūnas. | FACS ir process, kurā šūnu paraugu maisījums tiek sakārtots atbilstoši to gaismas izkliedes un fluorescences īpašībām divos vai vairāk konteineros. |
Kopsavilkums - plūsmas citometrija pret FACS
Šūna ir visu dzīvo organismu galvenā strukturālā un funkcionālā vienība. Šūnu šķirošana ir process, kurā šūnas tiek izolētas un diferencētas dažādās kategorijās, pamatojoties uz to intracelulārajām un ārpusšūnu īpašībām. Plūsmas citometrija un FACS ir divas svarīgas metodikas šūnu šķirošanā. Abi procesi ir izstrādāti, lai diferencētu šūnas pēc to optiskajām īpašībām. Plūsmas citometrija ir metodoloģija, kas tiek izmantota, analizējot neviendabīgu šūnu populāciju atbilstoši dažādām šūnu virsmas molekulām, lielumam un tilpumam, kas ļauj izpētīt atsevišķas šūnas. FACS ir process, kurā šūnu paraugu maisījums tiek sakārtots atbilstoši to gaismas izkliedes un fluorescences īpašībām divos vai vairāk konteineros. Šī ir atšķirība starp plūsmas citometriju un FACS.
Lejupielādējiet plūsmas citometrijas un FACS PDF versiju
Jūs varat lejupielādēt šī raksta PDF versiju un izmantot to bezsaistes vajadzībām, kā norādīts piezīmē. Lūdzu, lejupielādējiet PDF versiju šeit Starpība starp plūsmas citometriju un FACS
