Galvenā atšķirība - CFU pret MPN
Koloniju veidojošā vienība (CFU) un Visticamākais skaitlis (MPN) ir divas metodes, ko izmanto mikroorganismu uzskaitīšanai paraugos. Abi parametri tiek izmantoti ūdens kvalitātes un fekāliju indikatoru baktēriju noteikšanai ūdens paraugos. Koloniju veidojošā vienība ir mērs, ko izmanto, lai uzskaitītu dzīvotspējīgu baktēriju šūnu vai sēnīšu šūnu skaitu konkrētā parauga tilpumā vai svarā. Šī parametra standarta vienība ir CFU / ml vai CFU / g. Visticamākais skaitlis ir vēl viena vienība, ko izmanto, lai izmērītu dzīvotspējīgu baktēriju šūnu skaitu šķidrā paraugā. Galvenā atšķirība starp CFU un MPN ir tāda, ka CFU aprēķina no baktēriju un sēņu kolonijām, kas aug uz cietas agara plāksnes, savukārt MPN tiek aprēķināts no dzīvotspējīgām baktērijām, kas aug šķidrā vidē.
SATURS
1. Pārskats un galvenās atšķirības
2. Kas ir CFU
3. Kas ir MPN
4. Blakus salīdzinājums - CFU pret MPN tabulas veidā
5. Kopsavilkums
Kas ir CFU?
Koloniju veidojošā vienība (CFU) ir parametrs, kas mēra dzīvotspējīgu baktēriju vai sēņu šūnu skaitu dotajā paraugā. Metode, kas skaita kolonijas veidojošās vienības, tiek dēvēta par standarta plākšņu skaitīšanu. Dzīvotspējīgās kolonijas, kas parādās uz agara plāksnēm, izsaka kā CFU uz 1 ml (koloniju veidojošā vienība mililitrā) šķidruma parauga vai CFU uz 1 g (koloniju veidojošā vienība uz vienu gramu) cietās vielas parauga.
CFU mērīšanai izlasē tiek izmantotas divas izplatītas metodes. Tie ir izkliedētās plāksnes un ielejošās plāksnes metode. Šīs divas metodes atbalsta tehnika, ko sauc par sērijveida atšķaidīšanu. Sērijveidā atšķaidītie paraugi ļauj iegūt saskaitāmu koloniju skaitu uz agara virsmas. Zināmu parauga tilpumu var izkaisīt uz agara plāksnes virsmas vai sajaukt ar agaru un ielej uz plāksnes. Pēc tam plāksni inkubē un saskaita radušās kolonijas. Koloniju skaits ir saistīts ar mikroorganismu skaitu sākotnējā paraugā. Plāksnes, kurās redzams pārāk daudz koloniju vai pārāk maz koloniju, izslēdz, jo rezultāti šajās plāksnēs var nebūt statistiski precīzi. Statistiski vislabākais diapazons ir 30 - 300 kolonijas uz agara plāksnes. Tādēļ precīzai uzskaitei jāizvēlas pareizās plāksnes. Iepriekšminētajai funkcijai tiek veikta sērijveida atšķaidīšana.
Kad esat uzskaitījis dzīvotspējīgo koloniju skaitu uz plāksnēm, CFU / ml var aprēķināt, izmantojot šādu vienādojumu.
CFU uz ml sākotnējā parauga = koloniju skaits X plāksnes atšķaidīšanas koeficientā
Atšķaidīšanas koeficients = (1 / plāksnes atšķaidījums)
Piemēram, ja uz 10–4 atšķaidījuma plāksnes iegūst 149 kolonijas, baktēriju skaitu 1 ml sākotnējā parauga var aprēķināt šādi:
KVV / ml = (149) x (1/10 -4)
= 149 x 10 4 vai 1490000
= 1. 49 x 10 6
01. attēls: koloniju veidojošā vienība
Kas ir MPN?
Visticamākais skaitlis ir alternatīvs mērs CFU / ml. MPN arī novērtē dzīvotspējīgās šūnas šķidrā paraugā. Tajā uzskaitīti organismi, kas aug šķidrā kultūrā, un tas galvenokārt ir bakterioloģisks paņēmiens. Šī metode ir īpaši noderīga paraugiem, kas satur nelielu baktēriju šūnu koncentrāciju; piemēram, piens, dzeramais ūdens utt. MPN vērtību izsaka 100 ml tilpuma. MPN balstās uz statistikas metodi, kuras pamatā ir varbūtību teorija. Ir statistikas tabulas, kas izstrādātas, lai atrastu MPN vērtības uz 100 ml parauga. Šīs tabulas parāda rezultātus ar 95% ticamības robežu.
MPN vērtība tiek aprēķināta pēc metodes, ko sauc par vairāku mēģu fermentācijas metodi. Trīs mēģenes, kas satur piemērotu barotni, inokulē ar trim dažādiem parauga tilpumiem, piemēram, 10 ml, 1 ml un 0,1 ml, un inkubē augšanai. Pēc inkubācijas perioda caurulēm tiek piešķirta atzīme + (pozitīva) vai - (negatīva) par augšanas klātbūtni vai trūkumu. Pēc tam pozitīvo un negatīvo rezultātu modeli salīdzina ar MPN statistisko varbūtību tabulu, lai novērtētu mikroorganismu skaitu. Tad 100 ml parauga tiek dota MPN vērtība. MPN tiek plaši izmantots koliformu baktēriju noteikšanai ūdens paraugos.
02. attēls: MPN tabula
Kāda ir atšķirība starp CFU un MPN?
Atšķirīgs raksts vidū pirms tabulas
CFU pret MPN |
|
CFU ir mērs, ko izmanto, lai izteiktu dzīvotspējīgu baktēriju vai sēņu koloniju skaitu dotajā paraugā. | MPN ir alternatīvs mērījums CFU un mēra dzīvotspējīgu baktēriju šūnu skaitu šķidrā paraugā. |
Vienība | |
CFU / ml vai CFU / g | MPN / 100 ml |
Aprēķins | |
CFU aprēķina, saskaitot uz agara plāksnēm izaudzēto koloniju skaitu. | MPN aprēķina, salīdzinot pozitīvos un negatīvos mēģenes modeļus ar MPN statistikas tabulu. |
Sērijveida atšķaidīšanas tehnika | |
Pirms paraugu ievietošanas agara plāksnēs veic sērijveida atšķaidīšanu. | Sērijveida atšķaidīšana parasti netiek veikta, aprēķinot MPN |
Metodes | |
Spread plate metode un pour plate metode ir divu veidu metodes, lai iegūtu CFU. | Vairāku cauruļu fermentācija ir metode, ko izmanto, lai iegūtu MPN vērtību. |
Kopsavilkums - CFU pret MPN
Mikrobu augšanas mērīšana ir nepieciešama daudzu iemeslu dēļ. Pārtikas pārstrādes uzņēmumos ir nepieciešams izmērīt pārtikas mikroorganismu līmeni un veidu. Pārtikas rūpniecībā un medicīnā ir jānodrošina, ka sterilizācijas procedūras tiek efektīvi piemērotas. Notekūdeņu attīrīšanas iekārtās regulāri jāņem mikrobu skaits. Optimizējot procedūru molekulārajā bioloģijā, nepieciešams izmērīt koloniju skaitu uz plāksnēm. Tādējādi ir pieejamas dažādas uzskaites un augšanas mērīšanas metodes. CFU un MPN ir divas šādas metodes, kuras plaši izmanto dažādās jomās. CFU ir dzīvotspējīgu baktēriju un sēņu koloniju skaita mērījums noteiktā paraugā. To aprēķina, izmantojot standarta plātņu skaitīšanas metodi vai dzīvotspējīgu plākšņu skaitīšanas metodi. MPN ir vēl viens rādītājs, kas izsaka baktēriju šūnu skaitu, kas atrodas noteiktā šķidruma parauga tilpumā. To aprēķina, izmantojot vairāku mēģu fermentācijas metodi un MPN tabulu. Šī ir atšķirība starp CFU un MPN.
Lejupielādēt CFU vs MPN PDF versiju
Jūs varat lejupielādēt šī raksta PDF versiju un izmantot to bezsaistes mērķiem, kā norādīts piezīmēs. Lūdzu, lejupielādējiet PDF versiju šeit. Starpība starp CFU un MPN.