Galvenā atšķirība - HPLC pret HPTLC
Galvenā atšķirība starp HPLC un HPTLC ir tā, ka HPLC ļauj kvantitatīvi atdalīt komponentus paraugā, bet HPTLC neļauj kvantitatīvi atdalīt komponentus paraugā.
Hromatogrāfija ir fizikāla atdalīšanas metode, ko izmanto, lai atdalītu un identificētu komponentus maisījumā. Gan HPLC, gan HPTLC ir hromatogrāfijas metodes. HPLC ir augstas veiktspējas šķidruma hromatogrāfija. HPTLC ir augstas veiktspējas plānā slāņa hromatogrāfija.
SATURS
1. Pārskats un galvenās atšķirības
2. Kas ir HPLC
3. Kas ir HPTLC
4. Blakus salīdzinājums - HPLC vs HPTLC tabulas veidā
5. Kopsavilkums
Kas ir HPLC?
HPLC ir augstas veiktspējas šķidruma hromatogrāfija. Tas ir analītisks paņēmiens, ko izmanto, lai atdalītu, identificētu un kvantitatīvi izteiktu maisījuma komponentus. Šajā metodē paraugu izšķīdina piemērotā šķīdinātājā. Tad šķīdinātājs ar paraugu tiek izvadīts caur sūkni ar noteiktu spiedienu. Sūknis ir piepildīts ar cietu adsorbentu. Tad daži komponenti stipri saistās ar absorbējošu materiālu, bet citi - brīvi. Tas izraisa dažādu plūsmas ātrumu caur sūkni. Tāpēc komponentus var viegli atdalīt.
01. attēls: HPLC sistēma
Adsorbējošais materiāls, kas piepilda sūkni, ir pazīstams kā stacionāra fāze. Šķīdinātājs ar izšķīdušo paraugu ir pazīstams kā kustīgā fāze. Šajā tehnikā izmantoto sūkni sauc par kolonnu. Kolonna ir piepildīta ar adsorbējošu materiālu, visbiežāk ar silīcija dioksīda daļiņām. Šo daļiņu lielums var svārstīties no 2-50 μm. Atdalīšanas procesu ietekmē mobilās fāzes sastāvs un sistēmas temperatūra. Mijiedarbība starp stacionāro fāzi un paraugā esošo komponentu var būt hidrofobiska mijiedarbība, dipola un dipola mijiedarbība, jonu saite utt.
HPLC darbības spiediens ir ievērojami augstāks nekā tradicionālajā šķidruma hromatogrāfijā. Tas atrodas ap 50-350 bāriem. Atšķirība starp šķidruma hromatogrāfiju un HPLC ir tāda, ka šķidruma hromatogrāfijā paraugs smaguma dēļ iziet cauri kolonnai, bet HPLC gadījumā paraugs tiek saspiests caur kolonnu. Kolonnas izmērs un absorbējošās daļiņas ir arī ļoti mazas, salīdzinot ar tradicionālo šķidruma hromatogrāfiju. Tomēr izšķirtspēja, ko nodrošina HPLC tehnika, ir pārāka.
Kas ir HPTLC?
HPTLC ir augstas veiktspējas plānā slāņa hromatogrāfija. Tā ir uzlabota un automatizēta tradicionālās TLC forma. Šis paņēmiens nodrošina efektīvu izšķirtspēju īsā laika periodā. Šajā analīzes metodē paraugu un atsauci var analizēt vienlaikus, kas ļauj salīdzināt paraugu ar atsauci. Tas nodrošina uzlabotu analītisko precizitāti nekā citas hromatogrāfijas metodes. Analīzei nepieciešamais laiks ir mazāks. Tehnika ir lēta tehnika.
02. attēls: Pārtikas krāsvielu analīze, izmantojot HPTLC
HPTLC metode ir vienkāršs process, un tiek izslēgta arī parauga sagatavošanas darbība (tradicionālajā TLC parauga sagatavošanas posms tiek iekļauts pirms atdalīšanas. Šis posms ietver tīrīšanu un bagātināšanu). Šķīdinātāju var izmantot tieši bez iepriekšējas apstrādes, lai gan citas hromatogrāfijas metodes prasa iepriekšēju apstrādi, piemēram, degazēšanu, filtrēšanu utt.
HPTLC izmantotais adsorbējošais materiāls ir silīcija dioksīds ar ļoti maziem daļiņu izmēriem. Tradicionālajā TLC silīcija dioksīda daļiņu izmērs ir 5-20 μm, turpretim HPTLC tas ir 4-8 μm. Paraugu uzklāj uz HPTLC plāksnes, izmantojot aplikatoru. Tas nodrošina vienotu un drošu pielietojumu. Tad plāksnes ievieto kamerā ar kustīgo fāzi. Kamerai jābūt piesātinātai ar kustīgās fāzes tvaikiem. Pēc HPTLC procesa var noteikt pārvietotos plankumus. Nosakot plankumus uz plāksnes, HPTLC tehnikā tiek izmantots piemērots UV apgabals vai joda kamera.
Kāda ir atšķirība starp HPLC un HPTLC?
Atšķirīgs raksts vidū pirms tabulas
HPLC pret HPTLC |
|
| HPLC ir augstas veiktspējas šķidruma hromatogrāfija. | HPTLC ir augstas veiktspējas plānā slāņa hromatogrāfija. |
| Tehnika | |
| HPLC gadījumā kustīgā fāze ar šķīdinātāju tiek izvadīta caur kolonnu, kas piepildīta ar stacionāru fāzi. | HPTLC paraugs tiek pamanīts uz TLC plāksnes un tiek ievietots kamerā, kurā atrodas kustīgā fāze; tad paraugam ļauj migrēt uz augšu uz plāksnes kopā ar kustīgo fāzi. |
| Mērīšana | |
| HPLC gadījumā komponentu atdalīšanai paraugā izmanto atšķirības starp komponentu plūsmas ātrumiem caur kolonnu. | HPTLC, lai atdalītu komponentus paraugā, tiek izmantotas atšķirības starp attālumiem, ko katrs paraugs veicis paraugā. |
| Kvantitatīvā atdalīšana | |
| HPLC ļauj kvantitatīvi atdalīt komponentus paraugā. | HPTLC neļauj kvantitatīvi atdalīt komponentus paraugā. |
Kopsavilkums - HPLC pret HPTLC
HPLC un HPTLC ir divas hromatogrāfijas metodes. Galvenā atšķirība starp HPLC un HPTLC ir tā, ka HPLC ļauj kvantitatīvi atdalīt komponentus paraugā, bet HPTLC neļauj kvantitatīvi atdalīt komponentus paraugā.
