Galvenā atšķirība - RPMI pret DMEM
Lielākā daļa pētījumu ir saistīti ar dzīvnieku šūnu kultivēšanu, tāpēc šajos pētījumos ir nepieciešama dzīvnieku šūnu līniju uzturēšana īpašos augšanas apstākļos. Dzīvnieku šūnu kultivēšana tiek plaši veikta farmakoloģiskos pētījumos, lai identificētu zāļu metabolismu, slimību diagnostikā un vēža pētījumos. Šūnu kultūras barotne ir svarīgs dzīvnieku šūnu kultūras aspekts. Dulbecco modificētā ērgļa barotne (DMEM) un Rozvelas parka memoriālā institūta barotne (RPMI) ir divas barotnes, ko izmanto dzīvnieku šūnu kultivēšanā. RPMI ir barotne, ko plaši izmanto zīdītāju šūnu kultivēšanai suspensijas kultūrā. DMEM ir modificēts pamata barotnes veids, ar paaugstinātu aminoskābju un vitamīnu koncentrāciju līdz četrkāršai. DMEM izmanto šūnu kultivēšanai pielipušās kultūrās. Galvenā atšķirība starp abiem medijiem ir mediju kultūras veids. RPMI tiek izmantots suspensijas kultūrās, turpretim DMEM pielipušo šūnu kultivēšanai.
SATURS
1. Pārskats un galvenās atšķirības
2. Kas ir RPMI
3. Kas ir DMEM
4. Līdzības starp RPMI un DMEM
5. Blakus salīdzinājums - RPMI pret DMEM tabulas veidā
6. Kopsavilkums
Kas ir RPMI?
RPMI jeb Rosvela parka memoriālā institūta medijs tiek dēvēts arī par RPMI 1640. Mediju nosaukumu atvasināja institūts, kurā mediji tika atklāti. Šo barotni parasti izmanto dzīvnieku šūnu kultūrā, īpaši zīdītāju šūnu augšanai. Sākotnēji tie tika izstrādāti, lai audzētu cilvēka limfocītus.
RPMI ir iekļautas šādas sastāvdaļas.
- Glikoze
- pH indikators (fenolsarkans)
- Sāļi (nātrija hlorīds, nātrija bikarbonāts, dinātrija fosfāts, kālija hlorīds, magnija sulfāts un kalcija nitrāts)
- Aminoskābes
- Vitamīni (i-inozitols, holīna hlorīds, para-aminobenzoskābe, folijskābe, nikotinamīds, piridoksīna hidrohlorīds, tiamīna hidrohlorīds, kalcija pantotenāts, biotīns un riboflavīns, cianokobalamīns)
RPMI īpatnība ir paaugstināta fosfātu koncentrācija barotnē. RPMI tiek izmantots 5% oglekļa dioksīda atmosfērā. Tas nodrošinās maksimālos un optimālos apstākļus šūnu augšanai. Bikarbonātu bufera sistēma uztur barotnes pH 8,0 līmenī.
01. attēls: šūnu kultūra uz Petri trauka
RPMI pielietojums šūnu kultivēšanā
- Cilvēka T un B limfocītu, kaulu smadzeņu šūnu un hibridomas audzēšana.
- Izmanto, lai pētītu cilvēka neoplastiskās šūnas.
Kas ir DMEM?
Dulbecco modificētā ērgļa barotne (DMEM) ir modificēta barotne, kas ir komerciāli sagatavota. Vidējā pulvera sākotnējā tekstūra ir dzeltena. DMEM vitamīnu koncentrācija tiek palielināta līdz četrkāršai, tādējādi palielinot barības vielu saturu barotnē.
DMEM arī modificē, pievienojot vairāk sāļu, piemēram, dzelzs nitrātu, nātrija piruvātu un dažas nebūtiskas aminoskābes, piemēram, serīnu un glicīnu. Tiek mainīta arī glikozes forma barotnēs. Sākotnējais sastāvs sastāv no 1000 mg / l glikozes, turpretī DMEM koncentrācija tiek palielināta līdz 4500 mg / l. DMEM nepieciešama arī seruma barotnes papildināšana, jo tā nav pilnīga barotne. Visbiežāk DMEM tiek papildināts ar liellopu augļa serumu (FBS). FBS nodrošina nepieciešamos proteīnus un augšanas faktorus kultivēšanas procesam.
Barotnes pH mainās, pievienojot nātrija bikarbonātu. Barotnes pH pirms nātrija bikarbonāta pievienošanas ir aptuveni 6,80–7,40, turpretim pH pēc nātrija bikarbonāta pievienošanas ir robežās no 7,60 līdz 8,20. Barotnes uzglabāšanas temperatūra ir 2 - 8 0 C.
02. attēls: DMEM
DMEM pieteikumi
- Lai izpētītu poliomavīrusa plāksnes veidošanas spēju peles embrija šūnās.
- Kontaktu inhibēšanas pētījumos.
- Pētījumos un analīzēs vistu šūnu kultūras.
Kādas ir RPMI un DMEM līdzības?
- Gan RPMI, gan DMEM tiek izmantoti dzīvnieku šūnu kultūrā.
- Gan RPMI, gan DMEM barotnes ir šķidras formas.
- Gan RPMI, gan DMEM barotne satur neaizstājamās aminoskābes, vitamīnus un neorganiskos sāļus, kas nepieciešami augšanai.
- Gan RPMI, gan DMEM nesēji ir nepilnīgi. Tādēļ jāpievieno serums.
- Gan RPMI, gan DMEM barotnēs kā oglekļa avots tiek izmantota glikoze.
- Gan RPMI, gan DMEM barotnēm ir augstāks pH.
Kāda ir atšķirība starp RPMI un DMEM?
Atšķirīgs raksts vidū pirms tabulas
RPMI pret DMEM |
|
| RPMI ir barotne, ko plaši izmanto zīdītāju šūnu kultivēšanai suspensijas kultūrā. | DMEM ir modificēts bāzes barotnes veids ar paaugstinātu aminoskābju un vitamīnu koncentrāciju. |
| Papildu fosfātu klātbūtne | |
| Klāt RPMI. | Nav DMEM. |
| Izmantot | |
|
Pieradis kultivēt šūnas pielipušās kultūrās. Tas ir pieradis,
|
| Kultūras veidi | |
| RPMI izmanto suspensijas kultūrām. | DMEM lieto kultūrām, kurās ir pielipušas šūnas. |
Kopsavilkums - RPMI pret DMEM
Gan RPMI, gan DMEM plaši izmanto dzīvnieku šūnu kultivēšanā, it īpaši dzīvnieku šūnu līniju kultivēšanai, ieskaitot limfocītus in vitro. DMEM ir modificēta pamata barotne, kur ir paaugstināta barības vielu koncentrācija. RPMI, ko izstrādājis Rozvelas parka memoriālais institūts, un tas ir arī barotne, ko izmanto dzīvnieku šūnu kultivēšanā, īpaši zīdītāju limfocītiem. Abi mediji ir nopērkami. Tā ir atšķirība starp RPMI un DMEM.
