Galvenā atšķirība - HPLC pret LCMS
Pirms analizēsim atšķirību starp HPLC un LCMS, vispirms apskatīsim HPLC un LCMS nozīmi. Hromatogrāfija ir atdalīšanas tehnika ķīmiskajā analīzē, kad parauga sastāvdaļas tiek atdalītas, pārejot caur hromatogrāfisko barotni. Tas ietver arī mijiedarbību ar paraugu, stacionāro fāzi un mobilo fāzi. HPLC apzīmē augstas veiktspējas šķidruma hromatogrāfiju, un to izmanto kā šķidruma hromatogrāfijas metodi analītiskajā ķīmijā. Šķidrās hromatogrāfijas un masas spektroskopijas (LCMS) kombinācija ir izstrādāta izvēlēto biomolekulu kvantitatīvai analīzei, un tā ir ļoti jutīga, precīza un specifiska testa procedūra salīdzinājumā ar HPLC. Šī ir galvenā atšķirība starp HPLC un LCMC. Šis raksts jūs iepazīstinās ar HPLC un LCMC, kas nodarbojas ar ķīmisko analīzi un apspriež atšķirības starp HPLC un LCMS.
Kas ir HPLC?
Augstas veiktspējas šķidruma hromatogrāfija (HPLC) ir populāra analītiskās ķīmijas atdalīšanas tehnika. To galvenokārt izmanto, lai atdalītu komponentus, identificētu un kvantitatīvi noteiktu katru sastāvdaļu maisījumā. Agrāk šī metode bija pazīstama kā augstspiediena šķidruma hromatogrāfija, jo tā bija atkarīga no sūkņiem, lai caur spiedienu šķidru šķīdinātāju, kas satur parauga maisījumu, plūst cauri kolonnai, kas pildīta ar cietu adsorbentu. Katra parauga maisījuma sastāvdaļa savādāk mijiedarbojas ar cieto adsorbentu, kā rezultātā dažādiem komponentiem ir atšķirīgi plūsmas ātrumi. Tas var novest pie sastāvdaļu atdalīšanas, kad tās izplūst no HPLC kolonnas.
HPLC ir izmantots dažādiem lietojumiem, piemēram, D vitamīna līmeņa analīzei asinīs, sportistu nelegālai narkotiku lietošanai, nosakot zāļu atliekas urīnā, šķirojot sarežģīta bioloģiskā parauga sastāvdaļas pētniecības nolūkiem un farmaceitisko produktu analīzei un ražošanai.
Kas ir LCMS?
Šķidruma hromatogrāfija – masu spektrometrija (LCMS) ir analītiska metode, kas apvieno šķidruma hromatogrāfijas fiziskās atdalīšanas spējas ar masu spektrometrijas (MS) masas analīzes spējām. Šķidruma hromatogrāfija ir atdalīšanas paņēmiens, un masu spektrometriju izmanto, lai analizētu lādēto daļiņu masas un lādiņa attiecību. Fizisko atdalīšanu parasti panāk, izmantojot HPLC, vai arī LCMS, kas pazīstams arī kā HPLC-MS. LCMS ir dominējošā analītiskā tehnika, kurai ir ļoti augsta precizitāte, jutīgums un specifiskums salīdzinājumā ar HPLC. Tādējādi tas ir noderīgs daudzos pielietojumos, piemēram, pētniecības nolūkos, zāļu analīzē, pārtikas analīzē utt. LCMS galvenokārt izmanto, lai nošķirtu, noteiktu, identificētu un kvantitatīvi noteiktu konkrēta parauga bioķīmiskās īpašības sarežģītu ķīmisku maisījumu klātbūtnē.
Kāda ir atšķirība starp HPLC un LCMC?
HPLC un LCMC saīsinājums un definīcija
HPLC: HPLC apzīmē augstas veiktspējas šķidruma hromatogrāfiju. Tā ir atdalīšanas tehnika, ko galvenokārt izmanto, lai atdalītu komponentus, identificētu un kvantitatīvi noteiktu katru sastāvdaļu maisījumā.
LCMS: LCMS apzīmē šķidro hromatogrāfiju un masu spektrometriju. Tas ir analītisks paņēmiens, kas apvieno šķidruma hromatogrāfijas fiziskās atdalīšanas spējas ar masu spektrometrijas (MS) masas analīzes spējām.
HPLC un LCMC raksturojums
Klasifikācija
HPLC: šī ir tikai šķidruma hromatogrāfijas metode.
LCMS: Šī ir šķidrās hromatogrāfijas un masu spektrometrijas metodes kombinācija.
Efektivitāte
HPLC: salīdzinājumā ar LCMS, HPLC analīze ir mazāk efektīva un lēnāka.
LCMS: salīdzinot ar HPLC, LCMS analīze ir efektīva un ātrāka.
Jutīgums
HPLC: Salīdzinot ar LCMS, HPLC analīze ir mazāk jutīga.
LCMS: salīdzinot ar HPLC, LCMS analīze ir jutīgāka.
Konkrētība
HPLC: Salīdzinot ar LCMS, HPLC analīze ir mazāk specifiska.
LCMS: Salīdzinot ar HPLC, LCMS analīze ir specifiskāka.
Precizitāte
HPLC: dažu ķīmisko vielu noteikšanai HPLC sniedz mazāk precīzus rezultātus nekā LCMS.
LCMS: LCMS dažu ķīmisko vielu noteikšanai sniedz precīzākus rezultātus nekā HPLC.
Komponents
HPLC: HPLC var uzskatīt par LCMS sastāvdaļu.
LCMS: LCMS nevar uzskatīt par HPLC sastāvdaļu.
Jona avots
HPLC: jonu avots HPLC instrumentā nepastāv.
LCMS: jonu avots atrodas LCMS instrumentā.
Pieteikumi
HPLC: Jonus, polimērus, organiskās molekulas un biomolekulas var analizēt, izmantojot HPLC.
LCMS: Var analizēt organiskās molekulas un biomolekulas. Pretēji HPLC, LCMS var izmantot, lai pārbaudītu nepilnīgi izšķīdušos maisījumus.
Darbība
HPLC: HPLC instrumenta shēma ir parādīta 1. attēlā, un tā parasti ietver automātisko paraugu ņemšanas ierīci, sūkņus un detektoru. Paraugu ievada parauga maisījumu kustīgajā fāzē (šķīdinātāju, piemēram, ūdens, acetonitrila un / vai metanola, zem spiediena), kas to pārnes uz kolonnu. Sūkņi caur kolonnu nodrošina vēlamo kustīgās fāzes plūsmu un sastāvu. Kolonna ir piepildīta ar adsorbentu, kas ir graudaina cietā daļiņa, piemēram, silīcija dioksīds vai polimēri. Detektors rada signālu, kas ir proporcionāls parauga sastāvdaļu daudzumam kolonnā, tādējādi ļaujot kvantitatīvi analizēt izvēlētos parauga komponentus. HPLC instruments tiek kontrolēts, un datu analīzi nodrošina digitālais mikroprocesors un lietotāja programmatūra.
1. attēls: HPLC instrumenta diagramma
LCMS: LCMS instrumenta shēma ir parādīta 2. attēlā. Parauga ekstrakts tiek ievietots kolonnā, kas sastāv no HPLC. Šajā kolonnā ir saglabāti metabolītu paraugi, pamatojoties uz fizikālajām rakstzīmēm, un dažādi metabolīti dažādos laika intervālos plūst uz masas spektrometru. Masu spektroskopiju izmanto, lai novērtētu daļiņu masas, noteiktu molekulas elementu izvietojumu un noskaidrotu molekulas struktūras. Tomēr paraugs jā jonizē, lai radītu lādētas molekulas, lai noteiktu to masas un lādiņa attiecību. Tāpēc HPLC instrumentu vietā LCMS sastāv no trim papildu moduļiem, piemēram, dzelzs avota, masas analizatora un detektora. Jonu avots var pārveidot gāzes fāzes paraugu jonos un masas analizatorā, sagrupējot jonus pēc to masām, izmantojot elektromagnētiskos laukus. Visbeidzot,detektors kvantificē katra paraugā esošā jona vērtības un sniedz datus. LCMS tehniku var izmantot gan kvalitatīvai, gan kvantitatīvai lietošanai.
2. attēls: LCMS instrumenta diagramma
Noslēgumā HPLC ir šķidruma hromatogrāfijas metode, savukārt LCMS ir šķidruma hromatogrāfijas un masas spektrometrijas kombinācija. Abām šīm analīzes metodēm ir atšķirīgas īpašības, taču tās var izmantot, lai identificētu un kvantificētu pārtikas sastāvus, farmaceitiskos preparātus un citas bioaktīvas molekulas.
