Galvenā atšķirība - imūncitoķīmija pret imūnhistoķīmiju
Imūncitoķīmija (ICC) un imūnhistoķīmija (IHC) ir divas plaši izmantotas metodes molekulārajā diagnostikā, kas identificē un apstiprina gan neinfekciozu slimību, gan infekcijas slimību rašanos, pamatojoties uz molekulārajiem marķieriem, kas atrodas šūnās. Galvenā imūncitoķīmijas un imūnhistoķīmijas atšķirība ir molekula, ko šajos paņēmienos izmanto kā analīzes procedūru. ICC tiek izmantotas primārās un sekundārās antivielas, kas konjugētas ar tādiem marķieriem kā fluorescence, turpretī IHC, monoklonālās un poliklonālās antivielas tiek izmantotas diagnostikas noteikšanai.
SATURS
1. Pārskats un galvenās atšķirības
2. Kas ir imūncitoķīmija
3. Kas ir imūnhistoķīmija
4. Imunocitoķīmijas un imūnhistoķīmijas līdzības
5. Blakus salīdzinājums - imūncitoķīmija vs imūnhistoķīmija tabulas veidā
6. Kopsavilkums
Kas ir imūncitoķīmija (ICC)?
ICC izmanto primārās un sekundārās antivielas, kas saistītas ar marķieriem, piemēram, fluorescējošiem marķieriem vai enzīmiem, un ir spēcīga noteikšanas metode, lai noteiktu antigēnus, kas atrodas mērķa šūnās, kas var būt vai nu infekcijas šūnu daļiņas, vai vēža audzēja šūnas. Imūncitoķīmijai ir nepieciešami trīs veidu veidi.
- Primārā antiviela - kontrole, kas parāda primāro antivielu saistīšanās ar antigēnu specifiskumu
- Sekundārā antiviela - kontrole, kas parāda, ka etiķete ir specifiska primārajai antivielai
- Etiķetes vadīklas - parāda, ka marķējums ir pievienotās etiķetes rezultāts, nevis endogēnā marķējuma rezultāts.
01. attēls: Imūncitoķīmija iezīmē atsevišķus proteīnus šūnās (šeit simpātisko autonomo neironu aksonos esošā tirozīna hidroksilāze ir parādīta zaļā krāsā).
Primārā antivielu kontrole ir specifiska katrai jaunai antivielai, un to nevar atkārtot katram eksperimentam. Sekundārā antivielu kontrole tiek veidota, pamatojoties uz eksperimentā izmantotajām primārajām antivielām, un tā ir iekļauta katrā eksperimentā. Marķēšanas kontrole ir iekļauta, ja tiek mainīts procedūras nosacījums, mainīts paraugs vai ja tiek atklāts negaidīts marķējums.
Divi galvenie ICC pielietojumi ir radio imūno tests (RIA) un ar enzīmiem saistīts imūnsorbentu tests (ELISA). Visbiežāk izmantotā antiviela ir imūnglobulīns G.
Kas ir imūnhistoķīmija (IHC)?
Imūnhistoķīmijā avota paraugs satur monoklonālas un poliklonālas antivielas, lai noteiktu antigēnu klātbūtni svešās šūnās. Šī paņēmiena pamatā ir specifiska antigēna un antivielu saistīšanās reakcija. Atklāšanā izmantotās antivielas var marķēt ar dažādiem marķieriem; tie var būt fluorescences marķieri, radioaktīvi marķēti marķieri vai ķīmiski marķieri. Veicinot in vitro saistīšanos starp antigēnu un mērķa antivielu, var noteikt konkrēta šūnas proteīna klātbūtni vai neesamību.
02. attēls: Normālas nieres imūnhistoķīmiskā krāsošana ar CD10
Pašlaik zinātnieki ir iesaistīti mērķa antivielu izstrādē specifiskiem antigēniem, kas atrodas šūnās, kas var attīstīties vai nu kā ļaundabīgas audzēja šūnas, vai antigēniem, kas atrodas infekcijas izraisītājos, piemēram, HIV.
Kādas ir imūncitoķīmijas un imūnhistoķīmijas līdzības?
- Reakcijas ir ļoti specifiskas un precīzas ICC un IHC.
- ICC un IHC pielietojums ietver vēža un infekcijas slimību diagnostiku.
- Sterili apstākļi jāsaglabā abos apstākļos, un tie jāveic in vitro
- Abas metodes nodrošina atkārtojamus rezultātus.
- Abi ir ātri.
- Radiomarķēšana, fluorescences metodes tiek izmantotas kā noteikšanas metodes gan ICC, gan IHC.
- Abi ir balstīti uz antigēna un antivielu savienošanu pārī.
Kāda ir atšķirība starp imūncitoķīmiju un imūnhistoķīmiju?
Atšķirīgs raksts vidū pirms tabulas
Imunocitoķīmija (ICC) pret imūnhistoķīmiju (IHC) |
|
ICC izmanto primāras un sekundāras antivielas saistītus marķierus, piemēram, fluorescējošus marķierus vai enzīmus, un tā ir spēcīga noteikšanas metode, lai noteiktu antigēnus, kas atrodas mērķa šūnās. | IHC ir metode, kas izmanto monoklonālas un poliklonālas antivielas, lai noteiktu antigēnu klātbūtni, kas ir īpaši olbaltumvielu marķieri, kas novietoti uz šūnu virsmām. |
Avota paraugs | |
ICC izmanto paraugus no audiem, kas histoloģiski apstrādāti plānās daļās. | IHC izmanto paraugus, kas sastāv no šūnām, kas audzētas monoslānī, vai šūnām suspensijā, kas nogulsnējas uz priekšmetstikliņa. |
Paraugu apstrāde | |
ICC šūnām jābūt caurlaidīgām, lai atvieglotu antivielu iekļūšanu intracelulārajos mērķos. | IHC šūnas pirms krāsošanas ir piestiprinātas formalīnā, iestrādātas parafīnā. |
Kopsavilkums - imūncitoķīmija vs imūnhistoķīmija
Molekulārā diagnostika tiek izmantota, lai identificētu un apstiprinātu gan neinfekciozu slimību, gan infekcijas slimību rašanos, pamatojoties uz šūnās esošajiem molekulārajiem marķieriem. Molekulārie marķieri var būt olbaltumvielas vai DNS vai RNS sekvences; tādu tehnoloģiju kā ICC un IHC attīstība ir pavērusi ceļu zinātniekiem agrīnā stadijā slimības un tās cēloņu identificēšanai. Gan ICC, gan IHC ir atkarīgs no specifiskām reakcijām starp antivielu un antigēnu, kaut arī parauga avots. Galvenā atšķirība starp imūncitoķīmiju un imūnhistoķīmiju ir abu procedūru paraugu apstrāde.
Lejupielādēt imūncitoķīmijas un imūnhistoķīmijas PDF versiju
Jūs varat lejupielādēt šī raksta PDF versiju un izmantot to bezsaistes vajadzībām, kā norādīts piezīmē. Lūdzu, lejupielādējiet PDF versiju šeit. Atšķirība starp imūncitoķīmiju un imūnhistoķīmiju.