Galvenā atšķirība - situācijas hibridizācija pret imūnhistoķīmiju
Vēža un infekcijas slimību diagnostika ir populāra tendence, kad jaunās proteomikā un uz genomiku balstītās metodes tiek izmantotas, lai identificētu audzējus vai infekcijas šūnas, to proliferāciju un šūnu attīstības vietas, kā arī analizētu visvairāk pārnēsājamo un neinfekcijas slimību ģenētisko pamatu. Tā rezultātā precīzi apstrādās un izstrādās zāles, kā arī izstrādās pielāgotas terapijas slimībām. In situ hibridizācija (ISH) un imūnhistoķīmija (IHC) ir divas tik plaši izmantotas metodes vēža bioloģijā, un galvenā atšķirība starp in situ hibridizāciju un imūnķīmiju slēpjas molekulās, kuras tiek izmantotas analīzes procedūrā. ISH analīzē izmanto nukleīnskābes zondes, turpretī IHC diagnostikas noteikšanā izmanto monoklonālās un poliklonālās antivielas.
SATURS
1. Pārskats un galvenās atšķirības
2. Kas notiek situācijas hibridizācijā
3. Kas ir imūnhistoķīmija
4. Līdzības starp hibridizāciju situācijā un imūnhistoķīmiju
5. Blakus salīdzinājums - hibridizācija situācijā vs imūnhistoķīmija tabulas veidā
6. Kopsavilkums
Kas ir situācijas hibridizācija (ISH)?
In situ hibridizācija ir nukleīnskābju hibridizācijas paņēmiens, ko tieši veic audu daļai vai daļai, visā audā vai šūnās. Metode ir atkarīga no teorijas par Watson Crick komplementāro bāzes savienošanu, kā rezultātā tiek iegūti DNS-DNS hibrīdi vai DNS-RNS hibrīdi, kas var atklāt mutācijas gēnus vai identificēt nepieciešamo interesējošo gēnu. Hibridizācijas tehnikas laikā kā zondes tiek izmantotas vienpavedienu DNS sekvences, divējādas DNS sekvences, vienpavedienu RNS sekvences vai sintētiskas oligonukleotīdu sekvences, un šīs zondes 5 'galā apzīmē ar radioaktīvo fosforu identifikācijas procedūrām pēc autoradiogrāfijas vai marķē ar fluorescējošām krāsvielām.. Ir pieejami dažādi ISH paņēmieni, pamatojoties uz izmantotās zondes tipu un sekojošo vizualizācijas paņēmienu.
01. attēls: Fluorescējoša hibridizācija situācijā
ISH ir daudz lietojumu, galvenokārt infekcijas slimību molekulārajā diagnostikā, lai identificētu patogēnus un apstiprinātu patogēnu, izmantojot molekulāro diagnostiku. To lieto arī attīstības bioloģijas, kariotipu un filoģenētiskās analīzes un hromosomu fiziskās kartēšanas jomās.
Kas ir imūnhistoķīmija (IHC)?
IHC tehnikā galvenā analizētā molekula ir antigēns. IHC laikā monoklonālās un poliklonālās antivielas tiek izmantotas, lai noteiktu antigēnu klātbūtni pēc infekcijas vai ļaundabīgu šūnu proliferācijas stāvokļa. Metode ir balstīta uz antigēna un antivielu saistīšanos, un šai metodei tiek izmantoti enzīmu marķējumi; viens šāds pielietojums ir ELISA (ar enzīmiem saistīts imūnsorbenta tests). Marķieri var būt arī fluorescējošas marķētas antivielas vai radioaktīvi iezīmētas antivielas.
02. attēls: Imūnhistoķīmija
IHC plaši izmanto vēža šūnu noteikšanai. Diagnostikas procedūras ir vērstas uz antigēniem, kas atrodas audzēja šūnās, lai identificētu un raksturotu audzēju. Tā pati procedūra ir iekļauta infekcijas izraisītāju diagnosticēšanai. Monoklonālās un poliklonālās antivielas tiek izmantotas arī dažādu gēnu produktu analīzei, ļaujot antivielu un antigēnu saistošai reakcijai starp vēlamo olbaltumvielu un ievadīto sintētisko antivielu.
Kādas ir situācijas hibridizācijas un imūnhistoķīmijas līdzības?
- ISH un IHC ir ļoti specifiskas reakcijas.
- Abas metodes ir ļoti precīzas.
- Abus paņēmienus var izmantot vēža un infekcijas slimību diagnostikā.
- Šīs metodes tiek veiktas sterilās in vitro vidēs.
- Abas ir ātras metodes, kas nodrošina atkārtojamus rezultātus.
- ISH un IHC izmanto noteikšanas metodes, piemēram, radio marķēšanu, un fluorescences metodes.
Kāda ir atšķirība starp hibridizāciju situācijā un imūnhistoķīmiju?
Atšķirīgs raksts vidū pirms tabulas
In situ hibridizācija pret imūnhistoķīmiju |
|
| ISH ir nukleīnskābju hibridizācijas paņēmiens, ko tieši veic audu daļai vai daļai, vai visiem audiem. | IHC ir paņēmiens, kurā monoklonālās un poliklonālās antivielas izmanto, lai noteiktu antigēnu klātbūtni, kas ir īpaši olbaltumvielu marķieri, kas novietoti uz šūnu virsmām. |
| Analizēto biomolekulu tips | |
| ISH analizē nukleīnskābes. | IHC analizē olbaltumvielas-antigēnus. |
| Bioķīmiskās reakcijas pamats | |
| Šajā metodē notiek papildu bāzes savienošana pār DNS-DNS vai DNS-RNS. | Antigēna un antivielu mijiedarbība ir iesaistīta imūnhistoķīmijā. |
| Ar fermentiem saistītas noteikšanas metodes | |
| Ar fermentiem saistītas noteikšanas metodes ISH nevar izmantot. | IHC var izmantot ar fermentiem saistītas noteikšanas metodes. |
Kopsavilkums - situācijas hibridizācija pret imūnhistoķīmiju
Molekulārā diagnostika ir ātras un apstiprinošas metodes, kuras var izmantot, lai identificētu neinfekcijas slimību, piemēram, vēzi vai infekcijas slimību, piemēram, HIV vai tuberkulozi, pamatojoties uz molekulārajiem marķieriem, kas atrodas šūnās, kas noved pie slimības izpausmes. Molekulārie marķieri var būt ekspresētu olbaltumvielu formā vai ģenētiskā līmenī, pamatojoties uz kuru tiek ieviestas dažādas jaunas metodes, lai palielinātu efektivitāti, un tie ir mazāk darbietilpīgi, lai gan ar šīm metodēm ir saistītas lielas izmaksas. Tādējādi ISH ir atkarīgs no DNS-DNS vai DNS-RNS hibrīda veidošanās, un IHC ir atkarīgs no specifiskām reakcijām starp antivielu un antigēnu. Tā ir atšķirība starp in situ hibridizāciju.
Lejupielādēt PDF versiju vietējai hibridizācijai pret imūnhistoķīmiju
Jūs varat lejupielādēt šī raksta PDF versiju un izmantot to bezsaistes vajadzībām, kā norādīts piezīmē. Lūdzu, lejupielādējiet PDF versiju šeit. Atšķirība starp hibridizāciju situācijā un imūnhistoķīmiju.
