Galvenā atšķirība - imūnfluorescence pret imūnhistoķīmiju
Slimību diagnostika, kurā tiek izmantotas molekulāri bioloģiskās metodes, ir kļuvusi par jaunu klīniskās laboratorijas tehnoloģijas jomu. Tas ietver visus testus un metodes slimības identificēšanai un slimības cēloņa izpratnei, analizējot organismā DNS, RNS vai ekspresētos proteīnus. Straujais progress molekulārās diagnostikas jomā ļāva veikt pamata pētījumus par pārnēsājamām un neinfekcijas slimībām. Tos izmanto, lai noteiktu secības vai ekspresijas līmeņa izmaiņas svarīgākajos gēnos vai olbaltumvielās, kas saistītas ar slimību. Imūnfluorescence (IF) un imūnhistoķīmija (IHC) ir divas tik plaši izmantotas metodes vēža bioloģijā. IF ir IHC veids, kur monoklonālo un poliklonālo antivielu analīzei tiek izmantota fluorescences noteikšanas metode, savukārt IHC izmanto ķīmiskas metodes monoklonālo un poliklonālo antivielu noteikšanai. Šī ir galvenā atšķirība starp IF un IHC.
SATURS
1. Pārskats un galvenās atšķirības
2. Kas ir imūnfluorescence
3. Kas ir imūnhistoķīmija
4. Imunofluorescences un imūnhistoķīmijas līdzības
5. Blakus salīdzinājums - imūnfluorescence pret imūnhistoķīmiju tabulas veidā
6. Kopsavilkums
Kas ir imunofluorescence (IF)?
Imūnfluorescence ir noteikšanas tehnika, kurā testā izmantotās antivielas tiek iezīmētas, atklāšanas nolūkā izmantojot fluorescējošas krāsvielas vai fluorescējošas olbaltumvielas. Marķētas sekundāras antivielas var izraisīt nevēlamus fona signālus; tāpēc IF metodes pamatā ir pašas primārās antivielas marķēšana pašlaik, lai atklāšanas laikā izvairītos no nevēlamiem signāliem. Izmantojot šo paņēmienu, tiek novērsta nespecifiska saistīšanās starp primāro un sekundāro antivielu, un tā notiek ātrāk, jo nav iesaistīts sekundārs inkubācijas posms. Tiek uzlabota arī datu kvalitāte.
01. attēls: Divkārša imunofluorescences krāsošana BrdU, NeuN un GFAP
Fluorohromi vai fluorescējošas krāsvielas ir savienojumi, kas var absorbēt starojumu, vēlams, ultravioletais starojums, kas tiek ierosināts. Kad daļiņas no ierosinātā stāvokļa nonāk pamatstāvoklī, tās izstaro starojumu, ko uztver un nosaka detektors, lai izveidotu spektru. Ir ļoti svarīgi, lai fluorescējošais marķējums būtu savietojams un stabils konkrētajai reakcijai, un, lai iegūtu precīzus rezultātus, tam jābūt pareizi konjugētam ar antivielu. Viens no visbiežāk izmantotajiem fluorohromiem ir fluoresceīna izotiocianāts (FITC), kas ir zaļā krāsā, ar absorbcijas un emisijas maksimuma viļņu garumiem attiecīgi 490 nm un 520 nm. Rodamīns, kas ir vēl viens IF lietojams līdzeklis, ir sarkanā krāsā, un tā absorbcijas un emisijas maksimālie viļņu garumi ir 553 nm un 627 nm.
Kas ir imūnhistoķīmija (IHC)?
IHC ir molekulārā testēšanas metode, kas tiek izmantota, lai identificētu un apstiprinātu antigēna klātbūtni mērķa šūnā. Mērķa šūna varētu būt infekcijas daļiņa, mikrobu patogēns vai ļaundabīga audzēja šūna. IHC izmanto monoklonālās un poliklonālās antivielas, lai noteiktu antigēnu klātbūtni mērķa šūnu šūnu virsmā. Metode ir balstīta uz antigēna un antivielu saistīšanos. Ar šīm antivielām tiek konjugēts detektēšanas marķieris, lai noteiktu konkrētā antigēna klātbūtni vai neesamību. Šie marķieri var būt ķīmiski marķieri, piemēram, fermenti, fluorescējoši marķētas antivielas vai radioaktīvi iezīmētas antivielas.
02. attēls: Peles-smadzeņu šķēle, ko iekrāso imūnhistoķīmija
Vispopulārākais IHC pielietojums ir vēža šūnu bioloģija, lai identificētu ļaundabīgu audzēju klātbūtni, taču to izmanto arī infekcijas slimību noteikšanai.
Kādas ir imūnfluorescences un imūnhistoķīmijas līdzības?
- Imūnfluorescence un imūnhistoķīmija notiek in vitro apstākļos.
- Abas metodes balstās uz antigēna-antivielu
- Abi ir ļoti strauji paņēmieni.
- Šo metožu rezultāti ir atkārtojami.
- Abiem ir uzlabojusies datu kvalitāte.
- Šīs metodes tiek izmantotas vēža un infekcijas slimību diagnostikā.
Kāda ir atšķirība starp imūnfluorescenci un imūnhistoķīmiju?
Atšķirīgs raksts vidū pirms tabulas
Imūnfluorescence pret imūnhistoķīmiju |
|
| IF ir noteikšanas paņēmiens, kurā testā izmantotās antivielas tiek iezīmētas, izmantojot noteikšanai fluorescējošas krāsvielas vai fluorescējošas olbaltumvielas. | IHC ir noteikšanas paņēmiens, kurā testā izmantotās antivielas tiek iezīmētas, izmantojot noteikšanai ķīmiskas vielas vai radioaktīvus elementus. |
| Precizitāte | |
| IF tehnikā precizitāte ir augstāka nekā IHC. | IHC precizitāte ir zemāka. |
| Konkrētība | |
| IF ir konkrētāks. | IHC ir mazāk specifiska. |
Kopsavilkums - imūnfluorescence pret imūnhistoķīmiju
Molekulārie mehānismi ir radījuši daudzas izmaiņas medicīnas jomā, radot progresīvas molekulārās testēšanas metodes, kas izraisījušas revolūcijas diagnostikas jomā. Šie izgudrojumi ir ļāvuši ātri un precīzi identificēt un apstiprināt slimību, tādējādi nodrošinot veiksmīgu zāļu ievadīšanu un ražošanu. Šīs metodes tiek izmantotas arī farmakoloģijā, lai atrastu zāļu mērķus un apstiprinātu zāļu farmakokinētiskās īpašības zāļu metabolisma laikā. IF un IHC ir divas diagnostikas metodes, kuru pamatā ir antigēna un antivielu saistīšanās jēdziens, lai gan abās metodēs noteikšanas veids atšķiras. IF antigēna noteikšanai izmanto fluorescences principu, bet IHC antigēna noteikšanai izmanto ķīmiskās konjugācijas jēdzienu. Šī ir atšķirība starp IF un IHC.
Lejupielādēt imūnfluorescences un imūnhistoķīmijas PDF versiju
Jūs varat lejupielādēt šī raksta PDF versiju un izmantot to bezsaistes vajadzībām, kā norādīts piezīmē. Lūdzu, lejupielādējiet PDF versiju šeit. Atšķirība starp imūnfluorescenci un imūnhistoķīmiju.
