Galvenā atšķirība - pārejoša vs stabila transfekcija
Transfekcija ir process, kas saistīts ar eikariotu šūnu gēnu pārnešanu, izmantojot ķīmiskas vai fizikālas metodes. Transfekciju var klasificēt divos galvenajos veidos, ko sauc par pārejošu un stabilu transfekciju. Pārejošas transfekcijas laikā interesējošais gēns nespēj integrēties ar saimnieka genomu un tiek īslaicīgi izteikts saimniekorganismā, turpretim stabilā transfekcijā interesējošais gēns integrējas ar saimnieka genomu un ilgstoši tiek uzturēts vairākās paaudzēs. Šī ir galvenā atšķirība starp pārejošu un stabilu transfekciju. Abos gadījumos transfekcija ir veiksmīga, un tiek izteikti gēni.
SATURS
1. Pārskats un galvenās atšķirības
2. Kas ir pārejoša transfekcija
3. Kas ir stabila transfekcija
4. Blakus salīdzinājums - pārejoša vai stabila transfekcija
5. Kopsavilkums
Kas ir pārejoša transfekcija?
Transfekcija ir svarīgs līdzeklis gēnu ievietošanai eikariotu šūnās. Starp diviem transfekcijas veidiem pārejoša transfekcija ir izplatīts gēnu pārneses veids. Caur vektoru svešzemju gēni tiek pārveidoti saimniekšūnu iekšienē. Kad svešā DNS nonāk saimniekšūnā, tai ir divas iespējas. Tas var vai nu integrēties ar saimnieka genomu un atkārtoties, vai arī palikt iekšā, neintegrējoties genomā. Pārejoša transfekcija parāda ievietoto gēnu pagaidu izpausmi, neintegrējoties saimnieka genomā. Gēni izsaka un ražo kodēto olbaltumvielu, līdz šūna sadalās. Tomēr integrācijas nespējas dēļ tā nevar atkārtoties un ienākt nākamajās paaudzēs. Šis transfekcijas veids ir veiksmīgs īsu laika periodu. Šūnu dalīšanās laikā vai dažu citu faktoru dēļ svešā DNS tiek sadalīta. Pārejoša transfekcija tiek parādīta, ja svešā DNS ir ļoti savērpta DNS formā.
01. attēls: Pārejoša transfekcija
Kas ir stabila transfekcija?
Stabila transfekcija parāda veiksmīgu ārvalstu gēnu integrāciju saimnieka genomā. Kad sveša DNS nonāk saimniekšūnā, daļa svešās DNS integrējas saimniekorganisma genomā un kļūst par tā daļu. Tādējādi svešā DNS arī atkārtojas un pāriet nākamajās paaudzēs, kad uzņēmēja genoms atkārtojas. Šis transfekcijas veids ir sarežģīts un reti sastopams. Tomēr stabilās transfekcijas dēļ genomā šī īpašība tiek saglabāta ilgāku laiku vairākās paaudzēs.
Stabila transfekcija ir grūts process, un tam nepieciešama efektīva DNS piegāde un svešas DNS šūnu iegūšana tās genomā. Tādējādi lineārā DNS veicina stabilu transfekciju nekā apļveida DNS. Tomēr stabils transfekcijas ātrums ir aptuveni viens no 10 4 transformētajām šūnām. Stabilu transfekciju var novērot, veicot selektīva marķiera kotransfomāciju un veicot mākslīgo atlasi barotnē.
02. attēls: Stabila transfekcija
Kāda ir atšķirība starp pārejošu un stabilu transfekciju?
Atšķirīgs raksts vidū pirms tabulas
Pārejoša vs stabila transfekcija |
|
| Ārvalstu DNS neintegrējas saimniekorganisma genomā. | Ārvalstu DNS integrējas saimnieka genomā un kļūst par tā daļu. |
| Replikācija resursdatorā | |
| Pārejoši transfektēti gēni saimniekorganismā neatkārtojas. Tāpēc gēni netiek nodoti nākamajām paaudzēm. | Gēni tiek atkārtoti saimniekorganismā un tiek nodoti nākamajām paaudzēm. |
| Gēnu izteiksmes laiks | |
| Gēni tiek izteikti uz noteiktu laiku un pēc tam tie tiek iznīcināti. | Gēni kļūst par genoma daļu un pauž paaudzē uz ilgu laiku. |
| Izmantot | |
| Tas ir noderīgi, lai pētītu gēnu vai gēnu produktu īslaicīgas ekspresijas ietekmi. | Tas ir noderīgi, lai ilgtermiņā pētītu gēnu izpausmju ietekmi. |
| Transfekcijas noteikšana | |
| Gēni tiek izteikti un tos var viegli noteikt, ievietojot reportiera gēnu. | Stabilu transfekciju var viegli noteikt, ievietojot atlasāmo marķieri un atlasot, izmantojot mākslīgo atlasi barotnē. |
| Notikums un process | |
| Pārejoša transfekcija ir izplatīta, un to nav sarežģīti veikt. | Stabila transfekcija notiek reti, un to ir sarežģīti veikt. |
| DNS būtība | |
| Pārejošai transfekcijai ir piemērota ļoti pārspīlēta DNS. | Lineāra DNS ir piemērota stabilai transfekcijai. |
| Pieteikumi | |
| To izmanto, lai pētītu gēnu nokaušanu vai klusēšanu ar inhibējošām RNS, olbaltumvielu ražošanu nelielā apjomā | To izmanto olbaltumvielu ražošanai liela apjoma, ilgtermiņa farmakoloģijas pētījumos, gēnu terapijā, ilgtermiņa ģenētiskās regulēšanas mehānismu pētījumos |
Kopsavilkums - pārejoša vs stabila transfekcija
Pārejošas un stabilas transfekcijas ir divu veidu transfekcijas, kas parādītas gēnu pārnešanas laikā eikariotu šūnās ar nevīrusa sistēmām. Transformētā svešā DNS nav integrēta ar saimnieka genomu pārejošā transfekcijā, kamēr tā integrējas ar saimnieka genomu stabilā transfekcijā. Cirkulāri saritinātā DNS tiek parādīta pārejoša transfekcija, savukārt lineārā DNS dod priekšroku stabilai transfekcijai. Šī ir atšķirība starp pārejošu un stabilu transfekciju. Tomēr pārejoša transfekcija ir biežāka un vieglāka salīdzinājumā ar stabilu transfekciju. Bet viena izvēle starp diviem ir atkarīga no gēnu pārneses mērķa un pētījuma projekta ilguma.
