Galvenā atšķirība - horizontālā un vertikālā gēla elektroforēze
Gēla elektroforēze ir laboratorijas paņēmiens, ko ģenētikā izmanto, lai atdalītu maisījumus, kas satur DNS, RNS un citas olbaltumvielas, atbilstoši to attiecīgajam lādiņam un molekulu lielumam. DNS, RNS vai olbaltumvielas, kas jāatdala šajā metodē, tiek izvadītas caur gēlu, kas satur mazas poras. Molekulas caur gēlu virza elektriskais lauks. Molekulas iziet cauri gēla porām, un kustības ātrums ir apgriezti proporcionāls to attiecīgajam garumam. Tāpēc molekulas ar mazāku molekulāro izmēru pārvietosies ātrāk nekā molekulas ar lielāku molekulmasu. Elektrisko lauku rada lādiņa atšķirība divos želejas galos. Vienā galā ir pozitīvs lādiņš, bet otrā galā - negatīvs lādiņš. Tā kā DNS un RNS molekulas ir negatīvi lādētas,tie tiks piesaistīti gēla pozitīvi uzlādētajam galam. Gēla elektroforēze var būt no divām dažādām metodēm: horizontāla gēla elektroforēze un vertikāla gēla elektroforēze. Horizontālā gēla elektroforēzē gēls atrodas horizontālā orientācijā un ir iegremdēts nepārtrauktas darbības buferī, kas atrodas pašā gēla kastē. Vertikālā gēla elektroforēzē bufera sistēma ir orientēta vertikāli un ir pārtraukta ar divām kamerām, kas atrodas attiecīgi augšpusē un apakšā ar katodu un anodu. Šī ir galvenā atšķirība starp horizontālo un vertikālo gēla elektroforēzi.gēls atrodas horizontālā orientācijā un ir iegremdēts nepārtrauktas darbības buferī, kas atrodas pašā gēla kastē. Vertikālā gēla elektroforēzē bufera sistēma ir orientēta vertikāli un ir pārtraukta ar divām kamerām, kas atrodas attiecīgi augšpusē un apakšā ar katodu un anodu. Šī ir galvenā atšķirība starp horizontālo un vertikālo gēla elektroforēzi.gēls atrodas horizontālā orientācijā un ir iegremdēts nepārtrauktas darbības buferī, kas atrodas pašā gēla kastē. Vertikālā gēla elektroforēzē bufera sistēma ir orientēta vertikāli un ir pārtraukta ar divām kamerām, kas atrodas attiecīgi augšpusē un apakšā ar katodu un anodu. Šī ir galvenā atšķirība starp horizontālo un vertikālo gēla elektroforēzi.
SATURS
1. Pārskats un galvenās atšķirības
2. Kas ir horizontālā gēla elektroforēze
3. Kas ir vertikālā gēla elektroforēze
4. Līdzības starp horizontālo un vertikālo gēla elektroforēzi
5. Blakus salīdzinājums - horizontālā un vertikālā gēla elektroforēze tabulas formā
6. Kopsavilkums
Kas ir horizontālā gēla elektroforēze?
Horizontālā gēla elektroforēze izmanto pamata teoriju DNS, RNS vai olbaltumvielu molekulu atdalīšanai atbilstoši to attiecīgajam molekulu izmēram un lādiņam. Šajā metodē gēls atrodas horizontālā orientācijā un ir iegremdēts nepārtrauktā buferšķīdumā. Agarozes gēlu izmanto, lai gēla kasti atdalītu divos nodalījumos. Gēla kastes vienā galā ir anods, bet otrā galā katods. Kad tiek lietota strāva, šajā tehnikā izmantotais buferis ļauj izveidot lādiņa gradientu. Uzliekot lādiņu, gēlam ir tendence sakarst. Buferis darbojas arī kā dzesēšanas šķidrums, kas uztur temperatūru optimālā līmenī. Braukšanas bufera recirkulācija novērš pH gradienta veidošanos. Nepārtrauktu bufera sistēmu nevar izmantot horizontālā gēla elektroforēzē, jo abi gēla sistēmas nodalījumi tiek savienoti ar darba buferi. Akrilamīdu izmanto gēla elektroforēzes laikā, lai atdalītu olbaltumvielu maisījumus.
01. attēls: Horizontālās gēla elektroforēze
Horizontālā gēla elektroforēzē akrilamīdu nevar izmantot, jo gēla kaste ir pakļauta skābeklim. Skābekļa klātbūtnes dēļ tiek kavēta akrilamīda polimerizācija, un tas traucē gēla veidošanos. Horizontālā gēla elektroforēze ir bez piepūles metode, kas tiek izmantota DNS un RNS atdalīšanai.
Kas ir vertikālā gēla elektroforēze?
Vertikālās gēla elektroforēzes tehnika darbojas saskaņā ar gēla elektroforēzes primāro teoriju, taču tā tiek uzskatīta par sarežģītāku nekā horizontālās gēla elektroforēzes metode. Šis paņēmiens izmanto nepārtrauktu buferi. Katods atrodas augšējā kamerā, un anods atrodas apakšējā kamerā. Katrā nodalījumā esošie elektrodi nodrošina nepieciešamo elektrisko lauku. Starp divām piestiprinātām stikla plāksnēm ielej plānu želejas slāni. Tāpēc gēla augšējā daļa ir iegremdēta augšējā kamerā, un gēla apakšējā daļa ir iegremdēta kamerā apakšā. Pēc strāvas padeves neliela bufera daļa virzās uz apakšējo kameru no augšējās kameras caur gēlu. Šajā tehnikā izmantotā strāva ir minūtes vienības.
02. attēls: Vertikālā gēla elektroforēze
Vertikālā gēla elektroforēzes laikā buferis plūst tikai caur gēlu. Tas ļauj precīzi kontrolēt sprieguma gradientu atdalīšanas posmā. Var izmantot akrilamīda gēlu, jo nodalījumi nav pakļauti atmosfēras skābekļa iedarbībai. Sakarā ar mazāku akrilamīda gēla poru izmēru, precīzāku atdalīšanu var panākt ar lielāku izšķirtspēju.
Kādas ir horizontālās un vertikālās gēla elektroforēzes līdzības?
- Abas sistēmas darbojas saskaņā ar gēla elektroforēzes pamatteoriju.
- Anodu un katodu izmanto, lai nodrošinātu nepieciešamo elektrisko lauku abās sistēmās.
Kāda ir atšķirība starp horizontālo un vertikālo gēla elektroforēzi?
Atšķirīgs raksts vidū pirms tabulas
Horizontālā un vertikālā gēla elektroforēze |
|
| Horizontālā gēla elektroforēze ir gēla elektroforēzes paņēmiens, kurā gēls atrodas horizontālā orientācijā. | Vertikālā gēla elektroforēze ir gēla elektroforēzes paņēmiens, kurā gēls ir orientēts vertikāli. |
| Buferis | |
| Horizontālā gēla elektroforēze sastāv no nepārtraukta bufera. | Vertikālā gēla elektroforēzē darbības buferis ir pārtraukts. |
| Akrilamīda lietošana | |
| Akrilamīdu nevar izmantot horizontālai gēla elektroforēzei, jo gēla kaste tiek pakļauta atmosfēras skābekļa iedarbībai. | Tā kā želeja nav pakļauta atmosfēras skābekļa iedarbībai divu atsevišķu kameru dēļ, vertikālai gēla elektroforēzei varētu izmantot akrilamīdu. |
| Funkcija | |
| DNS un RNS maisījumu, bet ne olbaltumvielu, atdalīšanai biežāk izmanto horizontālu gēla elektroforēzi. | Vertikālo gēla elektroforēzi izmanto olbaltumvielu maisījumu atdalīšanai. |
Kopsavilkums - horizontālā un vertikālā gēla elektroforēze
Gēla elektroforēze ir laboratorijas tehnika, ko plaši izmanto, atdalot maisījumus, kas satur DNS, RNS un olbaltumvielu molekulas. Ir divas gēla elektroforēzes metodes: horizontālā un vertikālā gēla elektroforēze. Horizontālā gēla elektroforēzē braukšanas buferis ir nepārtraukts, savukārt vertikālā gēla elektroforēzē tas ir pārtraukts. Šī ir atšķirība starp horizontālo un vertikālo gēla elektroforēzi. Abas sistēmas darbojas saskaņā ar kopēju gēla elektroforēzes principu.
Lejupielādēt horizontālās un vertikālās gēla elektroforēzes PDF versiju
Jūs varat lejupielādēt šī raksta PDF versiju un izmantot to bezsaistes vajadzībām, kā norādīts piezīmē. Lūdzu, lejupielādējiet šeit PDF versiju. Starpība starp horizontālo un vertikālo gēla elektroforēzi.
